Muovendo dalle obiezioni al modello corpuscolare della luce, Christiaan HUYGENS (1629-1695) mise a punto un modello che attribuiva alla luce una natura ondulatoria.
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Formulata da Isaac Newton nel XVII secolo. La luce viene vista come composta da piccole particelle di materia (corpuscoli) emesse in tutte le direzioni. Oltre che essere matematicamente molto semplice (molto più della teoria ondulatoria) questa teoria spiega molto facilmente alcune caratteristiche della propagazione della luce che erano ben note all’epoca di Newton. Anche il […]
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Sviluppo della colonna significa un processo attraverso il quale i campioni vengono separati Gli eluati: • Man mano che il campione (eluato) fuoriesce, questo viene raccolto e analizzato, • Oppure si raccolgono tutti gli eluati e si analizzano dopo, Collettore di frazioni: • Ha lo scopo di raccogliere un volume ben preciso degli eluati, Rivelatore: • Gli […]
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Per effettuare separazioni di miscele con questa metodica si sfruttano i principi di: cromatografia di adsorbimento, cromatografia di ripartizione, gel filtrazione, scambio ionico. Cromatografia: fase stazionaria La fase stazionaria é supportata su lastre di vetro, fogli di alluminio o di plastica resistente ai solventi usati per l’eluizione. Fra i materiali più usati comunemente come fase […]
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Questa tecnica cromatografica liquido-liquido viene anche definita cromatografia di esclusione molecolare e viene usata per separare i vari componenti di una miscela in funzione delle loro dimensioni molecolari. Come fase stazionaria vengono usati i Sephadex®, sostanze di natura polisaccaridica (destrani) che formano dei reticoli tridimensionali. I Sephadex® si presentano come delle piccole sferette (dell’ordine dei decimi […]
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Cosa si intende per cromatografia di ripartizione Si intende per ripartizione il fenomeno che si osserva quando una sostanza, sulla base alla sua solubilità relativa, si distribuisce fra due solventi tra loro immiscibili. Coefficiente di ripartizione Ad una determinata temperatura il rapporto fra le concentrazioni della sostanza tra i due solventi sarà costante: K= Ca/Cb […]
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È il trasferimento e immobilizzazione di un campione di acidi nucleici su un supporto solido (in genere nitrocellulosa o nylon). Southern blotting: Il gel di agarosio contenente il DNA da trasferire viene posto su un ponte di carta da filtro, le cui estremità pescano all’interno di un recipiente contenente il tampone di trasferimento. La membrana viene posta in contatto con […]
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esistono diverse tipologie di blotting: Western Blotting: Le proteine separate in elettroforesi (SDS-PAGE) possono essere trasferite su un foglio di nitrocellulosa. Il trasferimento, di solito, si effettua per elettroblotting: il gel e la nitrocellulosa vengono posti in un apposito supporto a forma di sandwich immerso in un tampone nel quale ci sono due elettrodi paralleli. La corrente […]
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I gel di acrilammide sono preparati facendo polimerizzare monomeri di acrilammide in presenza di piccole quantità di N,N’-metilenbisacrilammide. La polimerizzazione inizia con l’aggiunta di ammonio persolfato (APS) e TEMED. Il TEMED catalizza la decomposizione dello ione persolfato: si producono radicali liberi che attaccano i monomeri di acrilammide e ne avviano la polimerizzazione. I gel denaturanti contengono, inoltre, anche SDS, […]
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Lug
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La pulizia della cabina di sicurezza rappresenta uno step fondamentale per garantire nel tempo i parametri di sicurezza e di affidabilità del nostro lavoro. Una adeguata e periodica procedura di disinfezione è perciò fondamentale, meglio se eseguita con metodo e perizia. Passo dopo passo la pulizia: E’ consigliabile utilizzare una sola mano, generalmente la destra. Ciò […]